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馬克薩姆-吉爾伯特測序

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馬克薩姆-吉爾伯特測序(英語:Maxam-Gilbert sequencing)是一項由阿倫·馬克薩姆沃爾特·吉爾伯特於1976~1977年間開發的DNA測序方法。此項方法基於:對核鹼基特異性地進行局部化學改性,接下來在改性核苷酸毗鄰的位點處DNA骨架發生斷裂[1]

馬克薩姆-吉爾伯特測序的舉例,切斷相同的被標記DNA片段的不同位點將會得到不同大小的被標記片段。這些片段接下來可被凝膠電泳分離開來。

馬克薩姆-吉爾伯特測序與桑格雙脫氧法一起是首批被廣泛採用的DNA測序方法,代表了第一代DNA測序方法。馬克薩姆-吉爾伯特測序不再廣泛使用,而被下一代測序方法取而代之。

歷史

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儘管弗雷德里克·桑格與阿蘭·科爾森發表他們的加減測序法兩年後,馬克薩姆與吉爾伯特才發表他們的化學測序法[2][3]。然而最初的桑格法須要在每次讀序之前克隆得到單鏈DNA產物,因此馬克薩姆-吉爾伯特測序法迅速得到了推廣,因為被純化的DNA可被直接使用。然而,隨着鏈終止法的改良(見下),馬克薩姆-吉爾伯特測序逐漸失寵,這是由於其:技術複雜性阻礙其成為標準分子生物學套裝使用、大量使用危險藥品以及難於擴大規模[4]

參考文獻

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  1. ^ Maxam AM, Gilbert W. A new method for sequencing DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. February 1977, 74 (2): 560–4. Bibcode:1977PNAS...74..560M. PMC 392330可免費查閱. PMID 265521. doi:10.1073/pnas.74.2.560. 
  2. ^ Sanger F, Coulson AR. A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase. J. Mol. Biol. May 1975, 94 (3): 441–8. PMID 1100841. doi:10.1016/0022-2836(75)90213-2. 
  3. ^ Sanger F. Determination of nucleotide sequences in DNA頁面存檔備份,存於網際網路檔案館). Nobel lecture, 8 December 1980.
  4. ^ Graziano Pesole; Cecilia Saccone. Handbook of comparative genomics: principles and methodology. New York: Wiley-Liss. 2003: 133. ISBN 0-471-39128-X.